PCR
P
olymerase Chain Reaction


TaKaRa One Shot LA PCR Mixを用いる場合

 One Shot LA PCR Mix(以下One Shot)は、PCRに必要な酵素、dNTP、バッファーがあらかじめ混合されている溶液。
 テンプレートとプライマーを加え、DDWでvolumeを調製するだけでPCRを行うことができる。

参考までに、One Shoの組成(TaKaRaプロトコルより)
TaKaRa LA Taq

2.5 units / 2.5 ul

dNTP Mixture

2x conc.; 各0.8 mM

LA PCR Buf. II

2x con.; 5 mM(Mg2+含む)

PCR反応溶液の調製(One Shot 1本あたり)
One Shot

25 ul

Templete

<1 ug

Primer (sense)

1 ul (50 pmol)

Primer (antisense)

1 ul (50 pmol)

DDW

up to 50 ul

 チューブに加える試薬の順番はどうでもよい。調整後30分経ってから反応してもOK。(TaKaRaプロトコルより)
 調製したらチューブをタッピングして溶液を攪拌。スピンダウン後、PCRを行う。

文責:T


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