実験Ⅰ
反応系①
|
酵素濃度（希釈率） |
吸光度変化(Abs/min) |
反応速度(unit/ml) |
|
1/50 |
0.10 |
4.8 |
|
1/40 |
0.10 |
4.8 |
|
1/30 |
0.17 |
8.2 |
|
1/20 |
0.24 |
11.6 |
|
1/10 |
0.54 |
26.1 |
反応系②
|
酵素濃度（希釈率） |
吸光度変化(Abs/min) |
反応速度(unit/ml) |
|
1/50 |
0.19 |
9.2 |
|
1/40 |
0.31 |
15.0 |
|
1/30 |
0.38 |
18.1 |
|
1/20 |
0.65 |
31.4 |
|
1/10 |
1.41 |
68.1 |
実験Ⅱ
反応系①
|
ｐH |
吸光度変化 |
反応速度 |
|
5 |
0.038 |
29 |
|
6 |
0.055 |
53 |
|
7 |
0.12 |
116 |
|
8 |
0.23 |
222 |
|
9 |
0.32 |
309 |
|
10 |
0.36 |
347 |
|
11 |
0.41 |
396 |
反応系②
|
ｐH |
吸光度変化 |
反応速度 |
|
5 |
0.24 |
464 |
|
6 |
0.40 |
772 |
|
7 |
0.43 |
831 |
|
8 |
0.37 |
715 |
|
9 |
0.17 |
328 |
|
10 |
0.012 |
23.2 |
|
11 |
0 |
0 |
実験Ⅲ
反応系①
|
S(mM) |
1/s |
吸光度変化 |
V(unit/ml) |
1/v |
S/v |
V/s |
|
2 |
0.5 |
0.04 |
1.9 |
0.53 |
1.1 |
0.95 |
|
5 |
0.2 |
0.08 |
3.9 |
0.26 |
1.3 |
0.78 |
|
10 |
0.1 |
0.15 |
7.2 |
0.14 |
1.4 |
0.72 |
|
15 |
0.067 |
0.20 |
9.7 |
0.103 |
1.5 |
0.65 |
|
20 |
0.05 |
0.21 |
10.1 |
0.099 |
2.0 |
0.51 |
|
50 |
0.02 |
0.31 |
15.0 |
0.067 |
3.3 |
0.3 |
|
100 |
0.01 |
0.39 |
18.8 |
0.053 |
5.3 |
0.188 |
反応系②
|
s |
1/s |
吸光度変化 |
v |
1/v |
S/v |
V/s |
|
0.02 |
50 |
0.11 |
5.3 |
0.19 |
0.0038 |
265 |
|
0.05 |
20 |
0.21 |
10.1 |
0.099 |
0.0055 |
202 |
|
0.10 |
10 |
0.26 |
12.6 |
0.080 |
0.0080 |
126 |
|
0.15 |
6.7 |
0.27 |
13.0 |
0.077 |
0.012 |
86.7 |
|
0.20 |
5 |
0.28 |
13.5 |
0.074 |
0.015 |
67.5 |
|
0.50 |
2 |
0.31 |
15.0 |
0.067 |
0.033 |
30 |
|
1.00 |
1 |
0.31 |
15.0 |
0.067 |
0.067 |
15 |
実験ⅢによるVmax,Kmの算定
|
グラフ番号 |
反応系① |
反応系② |
||
|
|
Vmax(unit/ml) |
Km(mM) |
Vmax |
Km |
|
a |
|
|
|
|
|
b |
426 |
20.8 |
680 |
0.042 |
|
c |
463 |
23.6 |
631 |
0.030 |
|
d |
443 |
21.5 |
644 |
0.036 |
７班
|
フラクションNo. |
吸光度変化 |
反応速度 |
|
溶血液 |
0.32 |
15.5 |
|
1 |
0 |
0 |
|
2 |
0 |
0 |
|
3 |
0 |
0 |
|
4 |
0 |
0 |
|
5 |
0 |
0 |
|
6 |
0 |
0 |
|
7 |
0 |
0 |
|
8 |
0 |
0 |
|
9 |
0.09 |
4.35 |
|
10 |
0 |
0 |
|
11 |
0 |
0 |
|
12 |
0 |
0 |
８班
|
フラクションNo. |
吸光度変化 |
反応速度 |
|
溶血液 |
0.24 |
11.6 |
|
1 |
0 |
0 |
|
2 |
0 |
0 |
|
3 |
0 |
0 |
|
4 |
0 |
0 |
|
5 |
0 |
0 |
|
6 |
0 |
0 |
|
7 |
0 |
0 |
|
8 |
0 |
0 |
|
9 |
0.044 |
2.13 |
|
10 |
0 |
0 |
|
11 |
0 |
0 |
|
12 |
0 |
0 |
平衡定数の計算
[Ⅰ]
1.183/6.21=0.1904
Lac+NAD⇔Pyr+NADH
|
|
Lac |
NAD |
Pyr |
NADH |
|
初期 |
(10×0.3)/3.0 |
(10×0.3)/3.0 |
0 |
0 |
|
反応量 |
-0.19 |
-0.19 |
＋0.19 |
＋0.19 |
|
平衡 |
(10×0.3)/3.0-0.19 |
(10×0.3)/3.0-0.19 |
0.19 |
0.19 |
[Ⅱ]
|
|
Lac |
NAD |
Pyr |
NADH |
|
初期 |
(10×0.6)/(3.0+0.3) |
(10×0.3)/(3.0+0.3) |
0 |
0 |
|
変化量 |
-0.248 |
-0.248 |
+0.248 |
+0.248 |
|
平衡 |
(10×0.6)/(3.0+0.3) -0.248 |
(10×0.3)/(3.0+0.3) -0.248 |
0.248 |
0.248 |
[Ⅲ]
|
|
Lac |
NAD |
Pyr |
NADH |
|
初期 |
(10×0.6)/(3.0+0.6) |
(10×0.3)/(3.0+0.6) |
(10×0.3)/(3.0+0.6) |
0 |
|
変化量 |
-0.197 |
-0.197 |
+0.197 |
+0.197 |
|
平衡 |
(10×0.6)/(3.0+0.6) -0.197 |
(10×0.3)/(3.0+0.6) -0.197 |
(10×0.3)/(3.0+0.6) +0.197 |
0.197 |
