Aggregation用ESの処理
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- 準備:氷箱
- Warm ESM, TE, PBS
- PBS 3mlでWash
- TE 0.5ml, 2min, 37℃
- 37℃より6cm dishを取り出してたたく(2分)
- ESMを1.5cc入れてsingle cell suspension 3-4回。継続して培養する場合はここで一部をsubcultureに回す。
- Feederを取り除くため、Clean bench内でdishを傾けて約7min静置。上澄みだけを14cc
tubeに取り、cell count (80μl)
- 大体、2.5 x 105 mlになるように希釈。
2-4ml位の細胞浮遊液を作成する。→aggregation
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