Freeze stock of ES clones
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- 24wellを顕微鏡でcheckして、Freezeするものに○印を、次回check必要なものに・印をつけてゆく。2回目以降はΔ、□、◇などと書く
- 氷、Freezing containerを準備
- 20% DMSO入りESMを準備(120clone x 500μl ≒ 60ml; 28ml
ESM + 7ml DMSO)
- (2platesぐらいずつ処理する)5ml pipet PBS適当量でwash
- 110μl trypsin, 37℃ 2min。この間にセラムチューブを準備
- Blue tipで390μl ずつESMを入れていく
- suspend 15回(Blue tipで)。セラムチューブに入れる
- 終わったらDMSO入りESMを500μlずつ入れていく
- Freeze (Freezing containerに入れ-80℃へ。4時間後以降に液体窒素中へ)
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