D-001-004

2003/04/22

実験操作:Quick CBB染色

 

Materials & Methods

 a. Quick CBB染色

   1) SDS-PAGEしたゲルを用意。

   2) 以下の組成で固定液を作製。

     Milli Q水 40ml

     100% MeOH 50ml

     酢酸 10ml

     - これが約5×6cmゲルに対しての分量だというが、十分多いくらい。しかし、ゲルが曲がっていたりして液にしっかり浸かっていないと、染色後に色が落ちるので注意。

   3) 固定液を半量(50ml)入れたタッパの中にゲルを入れ、振盪、10min。

   4) 固定液を交換して振盪、10min。

   5) 以下の組成で染色液を作製。

     Quick CBB kit染色液A 15ml

     Quick CBB kit染色液B 15ml

     - 試薬棚。

   6) 固定液を捨て、混合染色液を入れる。

   7) ラップをかけ、針で穴を数個あけ、沸騰するまでチン。

     - この染色液は50ml tubeでRT保存。再利用。

   8) Milli Qを入れ、端にキムワイプを2枚置き、沸騰するまでチン。

     - ラップ不要。

   9) 8)を数回繰り返す。

  10) Milli Q中で約30min振盪して微妙な色調製。

  11) DNA泳動撮影機のところに持っていく。ラップを敷いたGel viewerの上に置き、撮影。

  12) ゲルはハイブリバッグで密閉して保存可。

  13) 使ったタッパは100% MeOHで洗う。

Memo

 


このページは GeoCitiesです 無料ホームページをどうぞ