D-001-004
2003/04/22
実験操作:Quick CBB染色
a. Quick CBB染色
1) SDS-PAGEしたゲルを用意。
2) 以下の組成で固定液を作製。
Milli Q水 40ml
100% MeOH 50ml
酢酸 10ml
- これが約5×6cmゲルに対しての分量だというが、十分多いくらい。しかし、ゲルが曲がっていたりして液にしっかり浸かっていないと、染色後に色が落ちるので注意。
3) 固定液を半量(50ml)入れたタッパの中にゲルを入れ、振盪、10min。
4) 固定液を交換して振盪、10min。
5) 以下の組成で染色液を作製。
Quick CBB kit染色液A 15ml
Quick CBB kit染色液B 15ml
- 試薬棚。
6) 固定液を捨て、混合染色液を入れる。
7) ラップをかけ、針で穴を数個あけ、沸騰するまでチン。
- この染色液は50ml tubeでRT保存。再利用。
8) Milli Qを入れ、端にキムワイプを2枚置き、沸騰するまでチン。
- ラップ不要。
9) 8)を数回繰り返す。
10) Milli Q中で約30min振盪して微妙な色調製。
11) DNA泳動撮影機のところに持っていく。ラップを敷いたGel viewerの上に置き、撮影。
12) ゲルはハイブリバッグで密閉して保存可。
13) 使ったタッパは100% MeOHで洗う。
Memo